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奧林巴斯偏光顯微鏡是一種用于觀察材料的光學顯微鏡,其特點在于可以通過旋轉偏振器和樣品之間的相對方向來觀察材料的各種光學性質,例如雙折射、吸收等。該類型顯微鏡廣泛應用于地質、材料科學、生物學等領域。
在常規(guī)奧林巴斯偏光顯微鏡的電鏡方法中,樣品需要脫水,所脫掉的水份平均約占組織重量的三分之二;從取材到鏡下觀察,樣品還要經過一系列的化學與物理因素的處理。
上述任何一個因素都可能使生物樣品的成份和超微結構發(fā)生變化,從而造成人工假象。為此,建立了冷凍技術。冷凍技術不僅能解決某些常規(guī)方法不可避免的問題,揭示常規(guī)方法無法看到的一些結構細節(jié),而且所得結果也可與常規(guī)方法的結果進行比較,檢驗后者的客觀真實性。
奧林巴斯偏光顯微鏡的各種冷凍技術面臨的一個共同問題是避免產生冰晶、特別是大的冰晶。這些冰晶一旦產生,將會使細胞結構嚴重破壞。
因此,要設法在冷凍過程中只產生很小的冰晶,如果可能,好不產生冰晶,即使組織中的水份處在“玻璃態(tài)”。為了達到這一目的,目前采取的措施有兩個:
?。?)單純使用速凍時,為了不產生冰品,組織的冷凍速度應達到一100℃/(s·c航)或更快;
(2)使用保護劑后,組織的冷凍速度可降至10—lo09C/[s’cm),而不致產生大的冰晶。
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